什么是大鼠少突胶质前体细胞的原代培养?严格地说原代细胞培养是指从动物机体取出的组织经各种酶、螯合剂或机械方法处理,分散成单细胞,选用合适的培养基在体外进行的首次培养,也叫初代培养。通常把一代至十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。
原代细胞培养主要包括取材→分离→培养等三部分。原代培养是建立各种细胞系的开始,是实验人员需掌握的一项基本技术。原代培养的细胞其生物学特性未发生很大变化,接近和能反映体内生长特性,仍具有二倍体遗传特性,因此适用于药物敏感性试验、细胞分化、细胞生长代谢等实验研究。
大鼠少突胶质前体细胞取材应该注意什么?
动物体内大部分的组织细胞都可以在体外培养,但其难易程度与组织类型、分化程度、供体年龄、供体健康状态、原代培养方式等有直接关系,也是决定原代培养成败的关键。
因此原代取材我们应满足以下要求:
1、取材时注意无菌操作,使用的手术器械、培养皿以及试剂都应保证无菌;
2、使用的手术器械应锋利,使其在剪碎组织的时候尽可能减少对细胞的机械损伤;
3、对组织样本带有血液、脂肪、结缔组织的,在处理组织时应尽可能去除这些非目的组织;
4、如无特殊要求,可采用更加容易培养的组织进行培养,提高培养成功率;
5、取材过程尽量要快,保证组织新鲜;
6、原代培养应采用应用丰富的培养液,一般添加5%-20%胎牛血清;
7、对组织的来源、部位、取材时间、处理方法以及供体的一般情况都需做好记录。
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